基因枪法是什么?
一、基因枪法是什么?
基因枪法是什么?
在1987年,Vlein首先报道了应用此技术将TMV(烟草花叶病毒)RNA吸附到钨粒表面,轰击洋葱表皮细胞,经检测发现病毒RNA能进行复制,并以同样技术将CAT(Chloraphericol acetyltransferase氯霉素乙酰转移酶基因)基因导入洋葱表皮细胞。该技术已在烟草、水稻、小麦、黑麦草、甘蔗、棉花、大豆、菜豆、洋葱、番木瓜、甜橙、葡萄等多种作物上成功。
基因枪法: 将直径4um的钨粉或金粉在供体DNA中浸泡,然后用基因枪将这些粒子打入细胞、组织或器官中,具有一次处理多个细胞的优点,但转化效率较低。另外这种方法也用于基因治疗和抗体制备,并已取得初步成效。
二、基因枪该怎么使用?
如果说最基本的,当然是
载体、目的基因、宿主细胞和工具酶
恩,就这么简单,最基本的
如果你要实际操作的话,以质粒基因工程改造酵母菌为例(需要的设备材料用粗体标注):
首先
移液管/移液器+无菌枪头
是必备物品你需要含有质粒的
细菌
(一般是大肠杆菌),将它在超净工作台
中接种在培养细菌的液体培养基
中(一般是LB培养基),在恒温摇瓶柜
里摇瓶培养到足够浓度,用质粒抽提盒(试剂盒)+离心机
将细菌溶解,沉降掉蛋白质、拟核和其他杂质,提取出来质粒,其中还需要使用60°C恒温鼓风箱和37°C恒温培养箱
,再用光度计
测质粒浓度。将提取出来的质粒加入
限制性核酸内切酶
以及Buffer(酶发挥活性所需环境缓冲液)
,置于37°C水浴锅
中保温,至于保温多久看多贵的酶了。保温结束后,使用
DNA柱回收试剂盒
和离心机将切好的质粒回收,去掉酶和其他东西。再加入用同样方法切割好的、具有相同黏性末端的目的基因
,DNA连接酶
和Buffer
,置于16°C培养箱
水浴培养,时间也是看酶多贵。取细菌(大肠杆菌)制备
感受态细菌
保存于-70°C冰箱
中,制备过程不赘述,其中需要使用冷冻离心机
。用同样方法柱回收连接产物并加入在冰上解冻的感受态细菌悬液中,42°C水浴锅
热击90秒再置于冰上,加入LB液体培养基并置于恒温摇瓶柜培养使细菌恢复生长。制备
含抗生素(一般是氨苄青霉素)的LB固体培养基
并倒在培养皿
中冷却,用涂布棒
将大肠杆菌涂到平板上倒置于37°C培养箱培养,筛选出转化成功含有氨苄抗性基因的大肠杆菌。挑取部分单菌落置于添加了Loading(染色剂)、热稳定DNA聚合酶、Buffer、dNTP、引物RNA
的PCR小管
中,在PCR仪
中扩增。制备
琼脂糖和TAE缓冲液配比并添加DNA染色剂(接触毒性)
做的核酸凝胶
,将PCR产物和Marker(条带大小的指示剂)
点样在凝胶中用核酸凝胶电泳仪
检测含有目的基因质粒的是哪一个菌落确定是哪个菌落后,挑取该菌落接种在新的LB液体培养基中摇瓶培养,用同样的方法提取重组质粒,制备
感受态酵母菌
并将重组质粒加入转化。制备
含抗生素(同上)的YPD固体培养基
并将转化产物涂布在平板上筛选,并进行PCR验证或进一步验证它的目的基因表达产物即可。基因工程的操作到这基本就算完了。————分割线————
如果是动植物细胞,也就是转化的方式有所不同,比使Ti质粒转座子、基因枪、显微注射、病毒侵染等。
以上是我们实验室的操作方法,实验室不同甚至预算不同都会引起方法有略微的差别。比如有一些繁琐的步骤只要买一个试剂盒就能解决,但是试剂盒也不便宜就是了。
如果你要了解,那这些基本够了
如果你要亲手实践一下,劝你还是联系实验室吧,毕竟这些东西就算土豪也肉疼……
三、基因枪法和鸟枪法分别是干什么用的?基因枪法?
基因枪法: 将基因附着在金属粒子上,用高压将金属粒子打入植物细胞,达到转基因的目的。主要是用来进行单子叶植物转基因。 鸟枪法,是用酶,将DNA剪成一段段,看有没有合适的。主要用来提取转基因用的目的基因。下面是的解释。 鸟枪法(Shotgun method):使用基因组中的随机产生的片段作为模板进行克隆的方法。 “鸟枪法”最初主要用于测定微生物基因组序列。近年来,美国塞莱拉公司先后利用改进的全基因组“鸟枪法”完成了果蝇和人类基因组的测序工作,证明了它在测定大基因组上的可行性和有效性。 大致步骤
1.使用限制性内切酶将带有目的基因的DNA链切成若干小段。
2.再使用DNA连接酶将其整合到载体的基因中,并使其表达。
3.如果在某个细胞中得到了目的产物,就说明整合到该细胞中的DNA片段就是所需要的DNA片段。 基因枪法 该法又称粒子轰击(particle bombardment),高速粒子喷射技术(High-velocity particle microprojection)或基因枪轰击技术(gene gun bombardment), 将直径4um的钨粉或金粉在供体DNA中浸泡,然后用基因枪将这些粒子打入细胞、组织或器官中,具有一次处理多个细胞的优点,但转化效率较低,另外这种方法也用于基因治疗和抗体制备,并已取得初步成效。
四、美容美容和医学美容哪个好?
美容师属于保养调理,医学美容属于手术微整
五、美容液美容霜美容油使用步骤?
先用美容液,打开毛孔促进吸收,再用美容油,最后用霜锁水
六、手机美容的自助美容?
3D手机美容自助制作机主要特点
一,轻松实行手机个性增值服务专业化、标准化、简单化、系列化
二,3D整机技术,保护又美容,独步全球
三,支持任何手机,没有型号限制,可以和新机同步上市,支持任何外形
四,让顾客更多参与性,提高附加值,利于手机销售和店面形象提高
五,统一标准,任何人操作,结果都是标准的,利于连锁经营
六,简单上手,任何人简单培训都可自由掌握,不受人员自身因素限制
七,避免压货,通用材料,现场裁切,方便管理
八,先进的导气槽技术,即使粘贴多次,不留残胶
九,精准的3D数据,大秦专业手机美容师为手机做出专业合理的轮廓数据,经过实践反复试验定稿。
十,各种效果,适合各种人群,皮贴、艺术微雕、彩贴等。彩贴通过精细印刷,图片精美自然。
十一,专利保护,品牌授权
十二,支持多台自助终端,方面各种面积卖场推出个性化贴膜业务。
如果有客户需要照片进行个性化处理,需要在操作区,单独处理
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自助机外壳,电脑,17寸显示器,17寸触摸屏,销售小票单据打印机 6800元
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让客户互动参与的手机美容贴膜机
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延伸服务:可以采用双屏自助设备,可以有广告收入,一次投入,二份收益。
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标准统一,易于连锁
适合:在手机卖场里,电信营业厅,商场,电玩城,数码卖场等
七、美容院如何美容?
美容院就是通过一些医疗器械和药物在配上医生的手法清洁你的脸部。不建议去美容院,有时你都不知道你脸上涂的东西是护肤还是害肤,大多数美容院违规使用激素、抗生素等医用成分,导致你皮肤越来越敏感,越来越差,激素就是属于停用就发病,使用就马上变好的药物,搞得有的人还以为都是自己皮肤出问题,一去美容院护肤都好了。
怎样选择美容院:
1、看整体环境美容院的布置不一定非得走高大上,关键是让人感觉舒服,能让人真正放松身心。美容院里的空气很关键,毕竟装修可以解决很多问题,但对空气无能为力。呆在混浊的空气里久了会让人烦闷。虽然很多美容院会用熏香,但如果空气本身流通不好,再好的熏香也解决不了问题。2、看卫生死角因为要将自己的身体、自己的脸面交给对方打理,因此卫生问题尤要关注。一般而言,美容院大体卫生状况都不错,但一些卫生死角的处理是否到位反映了本美容院的从业态度。卫生死角包括卫生间的环境、梳妆台里梳子、镜子等的卫生、美容巾的味道及艾包、香薰炉等的卫生。3、了解美容院所用的产品不要相信美容院导购员吹嘘产品有多神奇,多有效,多么的高大上。很多美容院宣称的原装进口的玫瑰精油或许用的是云南产的精油,或许根本就是某个地下加工厂的产品,所以美容院是否连锁,产品的品牌很重要。
八、美容院(美容美体spa)的美容师和美容美发?
美容院(美容美体spa)里的美容师和美容美发店的美容师一般来说,工作内容都是差不多的。只是spa里面可能会分得更细,包括美体师、美疗师等等。这三种职位的差别你可以看一下这些总结:美疗师主要工作在美容院或者是美容养生馆,和美体师、美容师性质差别不大,都是为来店的顾客提供美容护理服务。美疗师主要侧重于通过spa护理达到某种疗效,一些美容院也会称之为“芳香美疗师”。 美体师主要工作在美容院或者是美容养生馆,以女性为主。和美容师相比,美体师的工作更侧重于身体的保养和护理。美容师是一种专业美容领域的职业称谓,主要工作在美容院,工作职责是为到美容院的客人提供购买产品后的服务,比如洗脸、保养、按摩、香薰、和减肥服操作等。
九、学徒美容需要考美容证吗?
要考的,这是必须考!美容师职业资格证,从事美容师职业人员考取的一种资格考试,本职业资格共分五级,分别为:初级(国家职业资格五级)、中级(国家职业资格四级)、高级(国家职业资格三级)、技师(国家职业资格二级)、高级技师(国家职业资格一级)。
十、如何给家具美容家具美容方法?
家具美容调色方法有哪些?家具美容调色的过程中应该注意的地方又有多少呢?今天为大家推荐的就是这两个方面信息,由此入手可以得知,如果自己家中购置时间已经非常久的木质家具表面受到损耗,比如说脱落掉漆或者是受到腐蚀,这个时候与其更换新的家具,还不如选择一些合理的工具,自己动手进行家具美容调色,只不过在这个操作过程中对于经验技术方面要求比较苛刻,具体可以参考下文,结合实际进行了解,制定合适合理的修补方法相信就可以达到满意的效果。
一、家具美容调色方法
前面我们说了颜色,现在就说说色漆的调配,注意事项;有色盲的人不能调配油漆而且要在自然光昭下配色,油漆的配色是要按样板的颜色进行,先试配小样,在对昭样板,确定内有几种颜色的复色漆,然后把这几种颜色漆分别装在罐中,先称毛重,再用它调色,配色完工后在称一次,这丙次称量之差,就是参加配色各种色漆的重量,作为调配大样的时的参考,在配色的过程中,参加配色的色漆要慢慢地加入,不停的搅动随时察看不要使它过多,由浅到深直到配准为止。
涂料稠度的调配
因贮藏或气候原因,造成涂料稠度过大,应在涂料中掺入适量的稀释剂,使其稠度降至符合施工要求。稀释剂的分量不宜超过涂料重量的20%,超过就会降低涂膜性能。稀释剂必须与涂料配套使用,不能滥用以免造成质量事故。如虫胶漆须用乙醇,而硝基漆则要用香蕉水。
家具油漆调色时需注意:
1.在调配复色漆时,要选性能相同的涂料相配。
2.配色时,先要选定主色,并估计各种颜色的比例,然后由浅入深地进行调配,国加国搅拌。